從分子水平上獲得特定DNA片段,包括目的基因分離,全長cDNA片段釣取,染色體步移,點突變,甲基化檢測,SNP檢測,線粒體分析等。通過技術(shù)手段,獲得可用于研究的目的基因序列,同時通過對基因序列基本形狀的分析,獲得更多的遺傳信息,如CDS編碼及翻譯情況,UTR區(qū)對表達(dá)的調(diào)控及轉(zhuǎn)錄后修飾,啟動子區(qū)重要的motif序列及TSS位點,甲基化位點,SNP情況,基因的同源性,物種的進(jìn)化地位等信息。是后續(xù)基因功能研究的基礎(chǔ)。
實驗樣品:
提取Total RNA的材料:動植物組織,細(xì)胞或菌液(保證材料充足);
或者由您直接提供總RNA: 3’RACE:Total RNA>15μg; 5’RACE:Total RNA>25μg。
序列信息:
大于200bp的已知序列(請注明已知序列的5’端及3’端):如果已知序列比較短,建議先進(jìn)行3’RACE再進(jìn)行5’RACE,以提高實驗的成功率;
實驗數(shù)據(jù)和參考文獻(xiàn):這將會幫助我們更好地理解您的實驗背景,有利于實驗的順利進(jìn)行。
實驗報告:引物信息 實驗過程 PCR產(chǎn)物照片;
測序結(jié)果:測序彩色波形圖、測序方向圖、堿基序列圖;
實驗產(chǎn)物:引物、測序用質(zhì)粒(限產(chǎn)生克隆測序的情況)。
注:
1. 請保證材料或者總RNA新鮮,如果基因的含量較低或者未知序列較長,樣品量需相應(yīng)增加;
2. 我們會根據(jù)已知序列進(jìn)行特異性擴(kuò)增,如果得不到目的序列或為非目的基因的序列,我們將停止實驗并收取實驗成本費(fèi)用;如果得到序列與您提供的序列有個別堿基不符,我們在征求您的意見后決定是否進(jìn)行RACE實驗;
3. 我們將設(shè)計跨內(nèi)含子引物PCR檢驗基因表達(dá)水平,如果經(jīng)驗證,樣品中基因表達(dá)含量低時,我們將與您溝通后,決定下一步實驗使用的方法;
4. 對于原核生物RNA 我們僅進(jìn)行5' RACE。
結(jié)果展示: